宁德市图书馆 内容
根据相关报道的文献，简单阐述多花黄精多糖的分级提取及初步结构分析的实例[1]。
33.3.1 实验材料
多花黄精原材料于2011年10月采于安徽省九华山，经洗净烘干，切片，用植物粉碎机粉碎成约20目，密封于磨口瓶-10℃冷冻保存，备用。
33.3.2 实验方法
33.3.2.1 分级提取
取多花黄精粉，用石油醚80℃回流脱脂24h，回收石油醚，药渣挥干溶剂；取去脂多花黄精粉30g，第一步：加入600mL的蒸馅水80笆提取4h，过滤得滤液，浓缩至原体积的1/6，然后用4倍体积的乙醇醇沉，静置24h后离心得沉淀，冷冻干燥得多花黄精多糖样品PCP1；第二步：取第一步中的滤渣，加入0.1%NaOH溶液80℃提取4h（料液比1:20，质量体积比），过滤得滤液，浓缩至原体积的1/6，用2mol/L的HC1调节至中性，然后用4倍无水乙醇醇沉，静置24h后离心得沉淀，冷冻干燥得PCP2；第三、四、五步同第二步，分别采用上一步的滤渣，用0.5%、1.0%、2.0%的NaOH溶液提取（料液比1：20），得多花黄精多糖样品PCP3、、PCP4、PCP5。
33.3.2.2 单糖组成分析
多花黄精多糖的单糖含量通过采用一步酸水解法分析其相应的水解产物含量来确定。称取多花黄精多糖样品5mg，加入0.125mL72%的硫酸，在室温条件下不断振动，然后加入1.35mL蒸馏水，稀释为1.475mL，然后放入121℃。烘箱中，加热2.5h，半小时晃动一次。冷却后，用0.22μm亲水性滤膜过滤，除去不溶物，将滤液稀释50倍后，采用高效离子色谱（HPIC）测定单糖组成。高效离子色谱仪配备脉冲安培检测器（PAD）及糖分析专用离子交换分析柱（CarboPacTMPA1，4mm×250mm，5μm）。
33.3.3 结果与讨论
33.3.3.1 得率与单糖组成分析
通过热水和进一步NaOH溶液提取得到的五个多糖样品PCP1、PCP2、PCP3、PCP4和PCP5，得率和糖分析的结果如表33-1所示，水提多糖的得率可以达到40.3%，进一步加入碱液提取滤渣中的多糖，当NaOH溶液的浓度由0.1%升至0.5%时，样品的得率从14.2%升高到20.1%，然后随着NaOH溶液浓度的升高，样品得率逐渐下降，当用2.0%的NaOH提取时，PCP5的得率最少，仅6.4%o从表33-1可以看出，PCP1-PCP4都含有一定量的阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖和半乳糖醛酸，以及少量的木糖和葡萄糖醛酸，除了甘露糖之外，其他单糖和糖醛酸，在多花黄精的同属植物黄精中均有发现[2]。在单糖组成分析中，水提和碱提的多糖样品呈现出了显著的差异，通过进一步的碱提，阿拉们糖的相对含量由水提的2.1%增加到20%左右，葡萄糖醛酸的相对含量也由0.5%提高到了7%左右，半乳糖的相对含量也得到了明显提高，可以达到总量的60%左右；而葡萄糖、甘露糖、半乳糖醛酸的相对含量降低了，在PCP4中，其相对含量分别降到了2.7%、6.7%、0.1%。在碱提的样品中，随着碱液浓度的增加，葡萄糖和半乳糖醛酸的相对含量逐渐降低，而甘露糖和葡萄糖醛酸的相对含量却在逐渐增加。
33.3.3.2 分子量及其分布
多糖样品的分子量是由凝胶色谱仪在水相中测定的，所得到的重均分子量、数均分子量以及分散系数值列于表33-2中。从数据可以看出，水提样品PCP1的分子量明显小于其他样品，并且与PCP1的分子量分布方式不同的是，进一步碱提得到的样品具有更广泛的分布范围，分散系数较大。
33.3.1 实验材料
多花黄精原材料于2011年10月采于安徽省九华山，经洗净烘干，切片，用植物粉碎机粉碎成约20目，密封于磨口瓶-10℃冷冻保存，备用。
33.3.2 实验方法
33.3.2.1 分级提取
取多花黄精粉，用石油醚80℃回流脱脂24h，回收石油醚，药渣挥干溶剂；取去脂多花黄精粉30g，第一步：加入600mL的蒸馅水80笆提取4h，过滤得滤液，浓缩至原体积的1/6，然后用4倍体积的乙醇醇沉，静置24h后离心得沉淀，冷冻干燥得多花黄精多糖样品PCP1；第二步：取第一步中的滤渣，加入0.1%NaOH溶液80℃提取4h（料液比1:20，质量体积比），过滤得滤液，浓缩至原体积的1/6，用2mol/L的HC1调节至中性，然后用4倍无水乙醇醇沉，静置24h后离心得沉淀，冷冻干燥得PCP2；第三、四、五步同第二步，分别采用上一步的滤渣，用0.5%、1.0%、2.0%的NaOH溶液提取（料液比1：20），得多花黄精多糖样品PCP3、、PCP4、PCP5。
33.3.2.2 单糖组成分析
多花黄精多糖的单糖含量通过采用一步酸水解法分析其相应的水解产物含量来确定。称取多花黄精多糖样品5mg，加入0.125mL72%的硫酸，在室温条件下不断振动，然后加入1.35mL蒸馏水，稀释为1.475mL，然后放入121℃。烘箱中，加热2.5h，半小时晃动一次。冷却后，用0.22μm亲水性滤膜过滤，除去不溶物，将滤液稀释50倍后，采用高效离子色谱（HPIC）测定单糖组成。高效离子色谱仪配备脉冲安培检测器（PAD）及糖分析专用离子交换分析柱（CarboPacTMPA1，4mm×250mm，5μm）。
33.3.3 结果与讨论
33.3.3.1 得率与单糖组成分析
通过热水和进一步NaOH溶液提取得到的五个多糖样品PCP1、PCP2、PCP3、PCP4和PCP5，得率和糖分析的结果如表33-1所示，水提多糖的得率可以达到40.3%，进一步加入碱液提取滤渣中的多糖，当NaOH溶液的浓度由0.1%升至0.5%时，样品的得率从14.2%升高到20.1%，然后随着NaOH溶液浓度的升高，样品得率逐渐下降，当用2.0%的NaOH提取时，PCP5的得率最少，仅6.4%o从表33-1可以看出，PCP1-PCP4都含有一定量的阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖和半乳糖醛酸，以及少量的木糖和葡萄糖醛酸，除了甘露糖之外，其他单糖和糖醛酸，在多花黄精的同属植物黄精中均有发现[2]。在单糖组成分析中，水提和碱提的多糖样品呈现出了显著的差异，通过进一步的碱提，阿拉们糖的相对含量由水提的2.1%增加到20%左右，葡萄糖醛酸的相对含量也由0.5%提高到了7%左右，半乳糖的相对含量也得到了明显提高，可以达到总量的60%左右；而葡萄糖、甘露糖、半乳糖醛酸的相对含量降低了，在PCP4中，其相对含量分别降到了2.7%、6.7%、0.1%。在碱提的样品中，随着碱液浓度的增加，葡萄糖和半乳糖醛酸的相对含量逐渐降低，而甘露糖和葡萄糖醛酸的相对含量却在逐渐增加。
33.3.3.2 分子量及其分布
多糖样品的分子量是由凝胶色谱仪在水相中测定的，所得到的重均分子量、数均分子量以及分散系数值列于表33-2中。从数据可以看出，水提样品PCP1的分子量明显小于其他样品，并且与PCP1的分子量分布方式不同的是，进一步碱提得到的样品具有更广泛的分布范围，分散系数较大。
