宁德市图书馆 内容
目前尚未见天仙果化学成分和药理活性研究方面的相关报道。笔者根据相关的文献报道，简单阐述天仙果根总黄酮提取工艺研究的实例[1]。
20.3.1 研究材料
野生天仙果，于2010年8月中旬采自遂昌白马山国家森林公园，经丽水市食品药品检验所李建良副主任中药师鉴定为天仙果。
20.3.2 实验方法
20.3.2.1 样品的预处理
随机选取20株天仙果，取根部，水洗、晾哂后置60℃烘箱中烘干，粉碎，混匀，过3号筛，装保鲜袋，冷藏备用。
20.3.2.2 供试品溶液制备
精密称定天仙果根粉末1.000g，置100mL容量瓶中，按设计的工艺条件（乙醇溶液、料液比、提取时间和提取次数）超声辅助（功率250W，频率40kHz）提取，真空抽滤，放冷，用相同浓度的乙醇溶液定容至容量瓶刻度，摇匀，得供试品溶液。
20.3.2.3 对照品溶液的制备
精密称取 120℃干燥至恒重的芦丁对照品适量，加浓度为70%的乙醇制成浓度为0、0.10mg/mL、0.20mg/mL，0.30mg/mL、0.40mg/mL和0.50mg/mL的溶液，即得。
20.3.2.4 线性关系的考察
精密量取对照品溶液1.0mL，分别置于一组10mL容量瓶中，分别加4.0mL浓度为70%的乙醇、0.3mL浓度为5%的NaNO2溶液，摇匀静置5min，接着加0.3mL浓度为10%的A1（NO3）3溶液，摇匀静置5min，然后加3.0mL浓度为4%的NaOH溶液，最后用浓度为70%的乙醇定容至刻度，摇匀，放置15min，以不加对照品溶液为空白，在510nm波长处测定吸光度。以芦丁溶液浓度（c）为横坐标，吸光度（A）为纵坐标，用最小二乘法作线性回归，计算线性回归方程。
20.3.2.5 总黄酮的测定
根据刘力恒等[2]和陈化等[3]的方法对总黄酮进行提取和测定，并通过单因素和正交实验进行分析。
20.3.3 实验结果与分析
（1）供试液总黄酮的检识实验结果表明，盐酸-镁粉反应显红色；硼氢化钠反应显红色；三氯化铝反应显黄色并有荧光；氨水反应呈黄褐色荧光，表明含有总黄酮成分。
（2）由线性关系的考察，计算得线性回归方程为:y=1.3200x-0.0071（R=0.9994）。实验结果表明，在0～0.05mg/mL范围内，芦丁浓度与吸光度的线性关系良好。
（3）单因素实验。
乙醇浓度在30%～50%时，总黄酮的得率增加；当乙醇浓度超过70%时，总黄酮的得率随乙醇浓度增加而下降。所以取浓度50%～70%乙醇作为提取溶剂较好。
总黄酮得率在料液比为1：5～1：20时呈上升趋势，但在1：20～1:25时变化不明显。从经济角度出发，选择料液比在1:15～1:25时较好。
提取时间在15～75min时，总黄酮得率呈上升趋势，但在75min后呈下降趋势。故时间以45～75min较佳。
提取次数与总黄酮得率呈正相关，综合考虑成本及提取效率的因素，提取次数以2次较好。
（4）正交实验。
由实验结果可知，4个因素影响从大到小依次为：料液比＞乙醇浓度＞提取时间＞提取次数。料液比与总黄酮得率呈正相关，料液比越高，天仙果根内外的总黄酮浓度差增高，所以总黄酮得率增加；在乙醇浓度为50%时提取得率最大，其原因可能是天仙果根总黄酮中的苷类含量较高，提取溶剂乙醇的浓度超过50%时，总黄酮的溶解性下降；另外提取时间对总黄酮提取得率也有一定影响，随着提取时间的延长，提取得率略有提高。最终决定以天仙果根总黄酮得率为指标，超声辅助提取溶剂为浓度50%乙醇溶液，料液比1:20，提取2次，每次60min。
（5）天仙果根的总黄酮含量。
以选择料液比1：20、提取次数2次、提取时间60min、提取溶剂乙醇浓度50%为条件进行验证实验，重复3次，测得天仙果根总黄酮得率平均值为27.83mg/g。
20.3.4 结论
实验利用超声波（功率250W，频率40kHz）辅助技术提取天仙果根中的总黄酮，其最佳工艺条件为：提取溶剂为浓度50%乙醇溶液，料液比1:20，提取2次，每次60min，在此工艺条件下，天仙果根的总黄酮得率为27.83mg/g。按照研究的提取工艺条件从天仙果根中提取总黄酮，可以获得较高的得率，值得进行进一步的研究。
20.3.1 研究材料
野生天仙果，于2010年8月中旬采自遂昌白马山国家森林公园，经丽水市食品药品检验所李建良副主任中药师鉴定为天仙果。
20.3.2 实验方法
20.3.2.1 样品的预处理
随机选取20株天仙果，取根部，水洗、晾哂后置60℃烘箱中烘干，粉碎，混匀，过3号筛，装保鲜袋，冷藏备用。
20.3.2.2 供试品溶液制备
精密称定天仙果根粉末1.000g，置100mL容量瓶中，按设计的工艺条件（乙醇溶液、料液比、提取时间和提取次数）超声辅助（功率250W，频率40kHz）提取，真空抽滤，放冷，用相同浓度的乙醇溶液定容至容量瓶刻度，摇匀，得供试品溶液。
20.3.2.3 对照品溶液的制备
精密称取 120℃干燥至恒重的芦丁对照品适量，加浓度为70%的乙醇制成浓度为0、0.10mg/mL、0.20mg/mL，0.30mg/mL、0.40mg/mL和0.50mg/mL的溶液，即得。
20.3.2.4 线性关系的考察
精密量取对照品溶液1.0mL，分别置于一组10mL容量瓶中，分别加4.0mL浓度为70%的乙醇、0.3mL浓度为5%的NaNO2溶液，摇匀静置5min，接着加0.3mL浓度为10%的A1（NO3）3溶液，摇匀静置5min，然后加3.0mL浓度为4%的NaOH溶液，最后用浓度为70%的乙醇定容至刻度，摇匀，放置15min，以不加对照品溶液为空白，在510nm波长处测定吸光度。以芦丁溶液浓度（c）为横坐标，吸光度（A）为纵坐标，用最小二乘法作线性回归，计算线性回归方程。
20.3.2.5 总黄酮的测定
根据刘力恒等[2]和陈化等[3]的方法对总黄酮进行提取和测定，并通过单因素和正交实验进行分析。
20.3.3 实验结果与分析
（1）供试液总黄酮的检识实验结果表明，盐酸-镁粉反应显红色；硼氢化钠反应显红色；三氯化铝反应显黄色并有荧光；氨水反应呈黄褐色荧光，表明含有总黄酮成分。
（2）由线性关系的考察，计算得线性回归方程为:y=1.3200x-0.0071（R=0.9994）。实验结果表明，在0～0.05mg/mL范围内，芦丁浓度与吸光度的线性关系良好。
（3）单因素实验。
乙醇浓度在30%～50%时，总黄酮的得率增加；当乙醇浓度超过70%时，总黄酮的得率随乙醇浓度增加而下降。所以取浓度50%～70%乙醇作为提取溶剂较好。
总黄酮得率在料液比为1：5～1：20时呈上升趋势，但在1：20～1:25时变化不明显。从经济角度出发，选择料液比在1:15～1:25时较好。
提取时间在15～75min时，总黄酮得率呈上升趋势，但在75min后呈下降趋势。故时间以45～75min较佳。
提取次数与总黄酮得率呈正相关，综合考虑成本及提取效率的因素，提取次数以2次较好。
（4）正交实验。
由实验结果可知，4个因素影响从大到小依次为：料液比＞乙醇浓度＞提取时间＞提取次数。料液比与总黄酮得率呈正相关，料液比越高，天仙果根内外的总黄酮浓度差增高，所以总黄酮得率增加；在乙醇浓度为50%时提取得率最大，其原因可能是天仙果根总黄酮中的苷类含量较高，提取溶剂乙醇的浓度超过50%时，总黄酮的溶解性下降；另外提取时间对总黄酮提取得率也有一定影响，随着提取时间的延长，提取得率略有提高。最终决定以天仙果根总黄酮得率为指标，超声辅助提取溶剂为浓度50%乙醇溶液，料液比1:20，提取2次，每次60min。
（5）天仙果根的总黄酮含量。
以选择料液比1：20、提取次数2次、提取时间60min、提取溶剂乙醇浓度50%为条件进行验证实验，重复3次，测得天仙果根总黄酮得率平均值为27.83mg/g。
20.3.4 结论
实验利用超声波（功率250W，频率40kHz）辅助技术提取天仙果根中的总黄酮，其最佳工艺条件为：提取溶剂为浓度50%乙醇溶液，料液比1:20，提取2次，每次60min，在此工艺条件下，天仙果根的总黄酮得率为27.83mg/g。按照研究的提取工艺条件从天仙果根中提取总黄酮，可以获得较高的得率，值得进行进一步的研究。
