宁德市图书馆 内容
根据相关报道的文献，简单阐述楤木中三萜皂苷类化合物提取、分离和鉴定的实例[4]。
10.5.1 实验材料
实验材料于2010年10月采于陕西省凤县的秦岭山脉，经陕西中医学院王继涛教授鉴定为五加科楤木属植物楤木。
10.5.2 楤木化学成分的提取与分离
楤木根皮3kg，用10倍量70%乙醇回流提取3次，1h/次。合并提取物，减压浓缩得浸膏1.2kg。浸膏经水分散后依次用石油醚、正丁醇萃取。正丁醇部分蒸干后得到总皂苷608g。取总皂苷部分（130g）采用硅胶柱色谱，以氯仿-甲醇-水梯度洗脱，得到14个流分。其中第II流分（9.5g）经硅胶柱色谱以氯仿-甲醇-水（7：3:1）梯度洗脱，并经SephadexLH-20纯化除杂，得到500mg，记为Frll-1，将分离纯化后的Frll-1进一步经HPLC半制备柱制备（紫外检测波长：206nm，流动相：70%甲醇，流速：8mL/min）得到1个单体化合物，记为化合物I（61mg）。第8流分（970mg）经SephadexLH-20纯化除杂，得到704mg，记为Fr8-1，将分离纯化后的Fr8-1进一步经HPLC半制备柱制备（紫外检测波长:206nm，流动相：72.3%甲醇，流速：8mL/min）得到3个单体化合物，分别记为化合物Ⅱ（10mg）、化合物Ⅲ（18mg）、化合物IV（203mg）。化合物Ⅰ～IV的结构见图10-3。
10.5.3 化合物的结构鉴定
化合物Ⅰ:白色无定形粉末（MeOH），mp182～185℃，Libermann-Berchard和Molish反应均为阳性，20%硫酸乙醇显紫红色，薄层酸水解检测到含有葡萄糖醛酸、葡萄糖和木糖。ESI-MSm/z：1126[M+Na]+，102[M-H]-；lH-NMR（500MHz，pyridine-ds:0.80（3H，s，Me-30），1.02（3H，s，Me-24），1.05（3H，s，Me-26），1.22（3H，s，Me-23），1.24（3H，s，Me-27），3.18（1H，m，H-3、H-18），3.67（3H，s，OMe），4.86（1H，d，J=7.1Hz，GluA-H-1），5.23（1H，d，J=7.8Hz，Glc-H-1），5.38（1H，br，s，H・12），5.49（1H，d，J=7.7Hz，Xyl-H-1），6.3O（1H，d，J=8.1Hz，28-Glc-H-l）。其波谱学数据除了与elatosideK的文献值[10，11]相符外，13C-NMR谱中多了52.1的碳信号，1H-NMR谱中多了3.67（s）的氢信号，在HSQC谱中显示该碳信号和氢信号直接相连，表明这多出来的碳氢信号是个甲基，且在HMBC谱中发现该氢信号和葡萄糖醛酸的6位碳有远程相关，故确定该甲基和葡萄糖醛酸的6位羧基成酯，命名为elatosideKmethylestero
化合物Ⅱ:白色针晶（MeOH），mp2I2～214℃，Libermann-Berchard和Molish反应均为阳性，20%硫酸乙醇显紫红色，薄层酸水解检测到含有葡萄糖醛酸、葡萄糖和阿拉伯糖。ESI-MSm/z:963[M+Na「，939[M-H]；1H-NMR（500MHz，pyridine-dsδ0.80（3H，s，Me-25），0.86（3H，s，Me-29），0.89（3H，s，Me-30），0.94（3H，s，Me-24），1.06（3H，s，Me-26），1.24（3H，s，Me-23），1.25（3H，s，Me-27），3.17（1H，d，J=9.5Hz，H-18），3.29（1H，d，J=7.6Hz，H-3），3.84（1H，s，OMe），4.94（1H，d，J=7.8Hz，GluA-H-1），5.39（1H，br，s，H-12），5.76（1H，s，Ara-H-1），6.31（1H，d，J=8.1Hz，28-Glc-H-l）。13C-NMR波谱学数据与文献值[12]相符，鉴定为aralosideAmethylester。
化合物Ⅲ：白色无定形粉末（MeOH），mp202～205℃，Libermann-Berchard和Molish反应均为阳性，20%硫酸乙醇显紫红色，薄层酸水解检测到含有葡萄糖醛酸、葡萄糖和木糖。ESI-MSm/z:1005[M+Na]+，981[M-H]-；1H-NMR（500MHz，pyridine-d5）δ0.74（3H，t，J=7.4Hz，Bu-H-4），0.80（3H，s，Me-25），0.86（3H，s，Me-30），0.89（3H，s，Me-29），0.95（3H，s，Me-24），1.07（3H，s，Me-26），1.25（3H，s，Me-23），1.25（3H，s，Me-27），3.17（1H，d，J=10.3Hz，
H-18），3.28（1H，d，J=7.5Hz，H-3），5.40（1H，brs，H-12），6.31（1H，d，J=8.1Hz，28-Glc-H-l）。13C-NMR波谱学数据与文献值[13]相符，鉴定为pseudoginsenosideRT1butylester。
化合物IV：白色针晶（MeOH），mp177～180℃，Libermann-Berchard和Molish反应均为阳性，20%硫酸乙醇显紫红色，薄层酸水解检测到含有葡萄糖醛酸、葡萄糖和阿拉伯糖。ESI-MSm/z:1005[M+Na]+，981[M-H]；1H-NMR（500MHz，pyridine-d5）δ0.76（3H，t），0.81（3H，s，Me-25），0.86（3H，s，Me-30），0.89（3H，s，Me-29），0.93（3H，s，Me-24），1.07（3H，s，Me-26），1.24（3H，s，Me-23），1.24（3H，s，Me-27），3.16（1H，d，J=9.8Hz，H-18），3.28（1H，d，J=7.5Hz，H-3），5.4O（1H，br，s，H-12），6.31（1H，d，5=8.1Hz，28-Glc-H-l）。13C-NMR波谱学数据与文献值[14]相符，鉴定为太白楤木皂苷I。
10.5.4 实验讨论与总结
楤木除了含有大量三站皂苷外，其他化学成分也十分复杂多样，它的广泛药理作用是各种成分有不同的药理作用所致。因此应对其单一成分进行药理研究，以便筛选出疗效高，毒副作用小的药品。
10.5.1 实验材料
实验材料于2010年10月采于陕西省凤县的秦岭山脉，经陕西中医学院王继涛教授鉴定为五加科楤木属植物楤木。
10.5.2 楤木化学成分的提取与分离
楤木根皮3kg，用10倍量70%乙醇回流提取3次，1h/次。合并提取物，减压浓缩得浸膏1.2kg。浸膏经水分散后依次用石油醚、正丁醇萃取。正丁醇部分蒸干后得到总皂苷608g。取总皂苷部分（130g）采用硅胶柱色谱，以氯仿-甲醇-水梯度洗脱，得到14个流分。其中第II流分（9.5g）经硅胶柱色谱以氯仿-甲醇-水（7：3:1）梯度洗脱，并经SephadexLH-20纯化除杂，得到500mg，记为Frll-1，将分离纯化后的Frll-1进一步经HPLC半制备柱制备（紫外检测波长：206nm，流动相：70%甲醇，流速：8mL/min）得到1个单体化合物，记为化合物I（61mg）。第8流分（970mg）经SephadexLH-20纯化除杂，得到704mg，记为Fr8-1，将分离纯化后的Fr8-1进一步经HPLC半制备柱制备（紫外检测波长:206nm，流动相：72.3%甲醇，流速：8mL/min）得到3个单体化合物，分别记为化合物Ⅱ（10mg）、化合物Ⅲ（18mg）、化合物IV（203mg）。化合物Ⅰ～IV的结构见图10-3。
10.5.3 化合物的结构鉴定
化合物Ⅰ:白色无定形粉末（MeOH），mp182～185℃，Libermann-Berchard和Molish反应均为阳性，20%硫酸乙醇显紫红色，薄层酸水解检测到含有葡萄糖醛酸、葡萄糖和木糖。ESI-MSm/z：1126[M+Na]+，102[M-H]-；lH-NMR（500MHz，pyridine-ds:0.80（3H，s，Me-30），1.02（3H，s，Me-24），1.05（3H，s，Me-26），1.22（3H，s，Me-23），1.24（3H，s，Me-27），3.18（1H，m，H-3、H-18），3.67（3H，s，OMe），4.86（1H，d，J=7.1Hz，GluA-H-1），5.23（1H，d，J=7.8Hz，Glc-H-1），5.38（1H，br，s，H・12），5.49（1H，d，J=7.7Hz，Xyl-H-1），6.3O（1H，d，J=8.1Hz，28-Glc-H-l）。其波谱学数据除了与elatosideK的文献值[10，11]相符外，13C-NMR谱中多了52.1的碳信号，1H-NMR谱中多了3.67（s）的氢信号，在HSQC谱中显示该碳信号和氢信号直接相连，表明这多出来的碳氢信号是个甲基，且在HMBC谱中发现该氢信号和葡萄糖醛酸的6位碳有远程相关，故确定该甲基和葡萄糖醛酸的6位羧基成酯，命名为elatosideKmethylestero
化合物Ⅱ:白色针晶（MeOH），mp2I2～214℃，Libermann-Berchard和Molish反应均为阳性，20%硫酸乙醇显紫红色，薄层酸水解检测到含有葡萄糖醛酸、葡萄糖和阿拉伯糖。ESI-MSm/z:963[M+Na「，939[M-H]；1H-NMR（500MHz，pyridine-dsδ0.80（3H，s，Me-25），0.86（3H，s，Me-29），0.89（3H，s，Me-30），0.94（3H，s，Me-24），1.06（3H，s，Me-26），1.24（3H，s，Me-23），1.25（3H，s，Me-27），3.17（1H，d，J=9.5Hz，H-18），3.29（1H，d，J=7.6Hz，H-3），3.84（1H，s，OMe），4.94（1H，d，J=7.8Hz，GluA-H-1），5.39（1H，br，s，H-12），5.76（1H，s，Ara-H-1），6.31（1H，d，J=8.1Hz，28-Glc-H-l）。13C-NMR波谱学数据与文献值[12]相符，鉴定为aralosideAmethylester。
化合物Ⅲ：白色无定形粉末（MeOH），mp202～205℃，Libermann-Berchard和Molish反应均为阳性，20%硫酸乙醇显紫红色，薄层酸水解检测到含有葡萄糖醛酸、葡萄糖和木糖。ESI-MSm/z:1005[M+Na]+，981[M-H]-；1H-NMR（500MHz，pyridine-d5）δ0.74（3H，t，J=7.4Hz，Bu-H-4），0.80（3H，s，Me-25），0.86（3H，s，Me-30），0.89（3H，s，Me-29），0.95（3H，s，Me-24），1.07（3H，s，Me-26），1.25（3H，s，Me-23），1.25（3H，s，Me-27），3.17（1H，d，J=10.3Hz，
H-18），3.28（1H，d，J=7.5Hz，H-3），5.40（1H，brs，H-12），6.31（1H，d，J=8.1Hz，28-Glc-H-l）。13C-NMR波谱学数据与文献值[13]相符，鉴定为pseudoginsenosideRT1butylester。
化合物IV：白色针晶（MeOH），mp177～180℃，Libermann-Berchard和Molish反应均为阳性，20%硫酸乙醇显紫红色，薄层酸水解检测到含有葡萄糖醛酸、葡萄糖和阿拉伯糖。ESI-MSm/z:1005[M+Na]+，981[M-H]；1H-NMR（500MHz，pyridine-d5）δ0.76（3H，t），0.81（3H，s，Me-25），0.86（3H，s，Me-30），0.89（3H，s，Me-29），0.93（3H，s，Me-24），1.07（3H，s，Me-26），1.24（3H，s，Me-23），1.24（3H，s，Me-27），3.16（1H，d，J=9.8Hz，H-18），3.28（1H，d，J=7.5Hz，H-3），5.4O（1H，br，s，H-12），6.31（1H，d，5=8.1Hz，28-Glc-H-l）。13C-NMR波谱学数据与文献值[14]相符，鉴定为太白楤木皂苷I。
10.5.4 实验讨论与总结
楤木除了含有大量三站皂苷外，其他化学成分也十分复杂多样，它的广泛药理作用是各种成分有不同的药理作用所致。因此应对其单一成分进行药理研究，以便筛选出疗效高，毒副作用小的药品。
