宁德市图书馆 内容
9.6.1 坚七扭的炮制
取原药，除去杂质，洗净，润软，切段或块片，干燥。
9.6.2 坚七扭的质量标准
经研究表明，可通过鉴别（粉末显微特征、薄层色谱）、检查（水分、灰分）、浸出物、含量测定对坚七扭的质量进行全面的控制。
9.6.2.1 坚七扭的检查
1）坚七扭的水分
水分按《中国药典》水分测定法中的烘干法检查。根据测定结果（表9-2），将水分限度定为不得过12.0%。
2）坚七扭的总灰分
总灰分按《中国药典》灰分测定法中的总灰分测定法检查。根据测定结果（表9-2），将总灰分限度定为不得过6.0%。
3）坚七扭的浸出物
浸出物按《中国药典》醇溶性浸出物测定法项下的热浸法检查。根据测定结果（表9-2），用50%乙醇作溶剂，将浸出物的限度定为应不得少于8.5%。
9.6.2.2 坚七扭的含量测定
现代临床研究表明，坚七扭的主要化学成分为没食子酸，没食子酸具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤等作用。这与畲药的理论与应用相吻合。故选用没食子酸为檵木根的指标性成分测定其含量（表9-2）。
检测波长的选择：取没食子酸对照品的溶液，用HPLC-DAD检测，在波长200～400nm范围扫描，经DAD光谱分析，结果以216nm波长处的吸收度值和峰形为优，故选用216nm作为检测波长。
流动相的确定：比较了甲醇-0.1%磷酸（10:90，体积比）、甲醇-0.4%磷酸（3：97）、甲醇-0.3%磷酸（2:98）等三种流动相，结果以甲醇-0.3%磷酸（2:98）分析效果较优，故选用此作为流动相。
样品的提取：对提取溶剂、提取方法分别做了考察，以没食子酸的得率作为指标，结果是5%盐酸水浴中水解提取〉用水煎煮提取＞30%甲醇加热回流提取＞30%甲醇超声提取。考察盐酸的酸度（2%、5%、10%）和提取的时间（2h、3h、4h）对测定结果的影响，结果发现以5%盐酸溶液提取效果最优，水浴中水解4h，提取完全。因此，本实验选用5%盐酸溶液水浴中水解4h为样品的提取方法。
1）仪器与试药
Agilent1260高效液相色谱仪（美国安捷伦科技有限公司）；G4212B二极管阵列检测器（美国安捷伦科技有限公司）；电子天平（XS105DU，瑞士梅特勒公司）；水浴锅（HH-4，上海梅香仪器公司）。
甲醇为色谱纯（Merck），盐酸、磷酸为分析纯，水为娃哈哈纯净水。没食子酸对照品（批号：110831-201204，含量89.9%，使用前无需处理），购自中国药品生物制品检定所。
2）色谱条件
色谱柱：AgilentSB-C18色谱柱（4.6mm×250mm，5uym）（美国安捷伦科技有限公司）；流动相：甲醇-0.3%磷酸溶液（2:98），流速1.0mL/min；柱温：30℃；检测波长：216nm；自动进样，进样量：5μL。
3）对照品溶液的制备
精密称取没食子酸对照品适量，用50%甲醇稀释成每1mL含没食子酸30μg的对照品溶液。
4）供试品溶液的制备
药材粉碎，过二号筛，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入5%盐酸溶液50mL，密塞，称定质量，水浴中加热水解4h，放冷至室温，再称定质量，用5%盐酸溶液补足减失的质量，摇匀，过滤，精密量取续滤液5mL置10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.45um微孔滤膜过滤，取续滤液，即可。
5）系统适应性实验
分别精密吸取“3）、4）”项下溶液，按“2）”项下色谱条件进样，记录色谱图，见图9-8。由图可见，在该色谱条件下，没食子酸与其他成分可达到基线分离，分离度大于1.5，理论塔板数在8000以上，分离效果较好。
取原药，除去杂质，洗净，润软，切段或块片，干燥。
9.6.2 坚七扭的质量标准
经研究表明，可通过鉴别（粉末显微特征、薄层色谱）、检查（水分、灰分）、浸出物、含量测定对坚七扭的质量进行全面的控制。
9.6.2.1 坚七扭的检查
1）坚七扭的水分
水分按《中国药典》水分测定法中的烘干法检查。根据测定结果（表9-2），将水分限度定为不得过12.0%。
2）坚七扭的总灰分
总灰分按《中国药典》灰分测定法中的总灰分测定法检查。根据测定结果（表9-2），将总灰分限度定为不得过6.0%。
3）坚七扭的浸出物
浸出物按《中国药典》醇溶性浸出物测定法项下的热浸法检查。根据测定结果（表9-2），用50%乙醇作溶剂，将浸出物的限度定为应不得少于8.5%。
9.6.2.2 坚七扭的含量测定
现代临床研究表明，坚七扭的主要化学成分为没食子酸，没食子酸具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤等作用。这与畲药的理论与应用相吻合。故选用没食子酸为檵木根的指标性成分测定其含量（表9-2）。
检测波长的选择：取没食子酸对照品的溶液，用HPLC-DAD检测，在波长200～400nm范围扫描，经DAD光谱分析，结果以216nm波长处的吸收度值和峰形为优，故选用216nm作为检测波长。
流动相的确定：比较了甲醇-0.1%磷酸（10:90，体积比）、甲醇-0.4%磷酸（3：97）、甲醇-0.3%磷酸（2:98）等三种流动相，结果以甲醇-0.3%磷酸（2:98）分析效果较优，故选用此作为流动相。
样品的提取：对提取溶剂、提取方法分别做了考察，以没食子酸的得率作为指标，结果是5%盐酸水浴中水解提取〉用水煎煮提取＞30%甲醇加热回流提取＞30%甲醇超声提取。考察盐酸的酸度（2%、5%、10%）和提取的时间（2h、3h、4h）对测定结果的影响，结果发现以5%盐酸溶液提取效果最优，水浴中水解4h，提取完全。因此，本实验选用5%盐酸溶液水浴中水解4h为样品的提取方法。
1）仪器与试药
Agilent1260高效液相色谱仪（美国安捷伦科技有限公司）；G4212B二极管阵列检测器（美国安捷伦科技有限公司）；电子天平（XS105DU，瑞士梅特勒公司）；水浴锅（HH-4，上海梅香仪器公司）。
甲醇为色谱纯（Merck），盐酸、磷酸为分析纯，水为娃哈哈纯净水。没食子酸对照品（批号：110831-201204，含量89.9%，使用前无需处理），购自中国药品生物制品检定所。
2）色谱条件
色谱柱：AgilentSB-C18色谱柱（4.6mm×250mm，5uym）（美国安捷伦科技有限公司）；流动相：甲醇-0.3%磷酸溶液（2:98），流速1.0mL/min；柱温：30℃；检测波长：216nm；自动进样，进样量：5μL。
3）对照品溶液的制备
精密称取没食子酸对照品适量，用50%甲醇稀释成每1mL含没食子酸30μg的对照品溶液。
4）供试品溶液的制备
药材粉碎，过二号筛，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入5%盐酸溶液50mL，密塞，称定质量，水浴中加热水解4h，放冷至室温，再称定质量，用5%盐酸溶液补足减失的质量，摇匀，过滤，精密量取续滤液5mL置10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.45um微孔滤膜过滤，取续滤液，即可。
5）系统适应性实验
分别精密吸取“3）、4）”项下溶液，按“2）”项下色谱条件进样，记录色谱图，见图9-8。由图可见，在该色谱条件下，没食子酸与其他成分可达到基线分离，分离度大于1.5，理论塔板数在8000以上，分离效果较好。
