第9章 坚七扭

知识类型: 析出资源
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内容出处: 《整合畲药学研究》 图书
唯一号: 130920020230004173
颗粒名称: 第9章 坚七扭
分类号: R298.3
页数: 19
页码: 186-204
摘要: “坚七扭”是指金缕梅科檵木属植物檵木(Loropetalum chinensis)的干燥根,主要由畲族习用,并被收录于《浙江省中药炮制规范》中。除根外,畲族民间也常使用檵木的茎作药材
关键词: 中医药 植物资源 坚七扭

内容

9.1 植物资源
  坚七扭,即金缕梅科(Hamamelidaceae)檵木属植物檵木(Loropetalumchinensis)的干燥根,以畲族习用药材名义收载于2015年版《浙江省中药炮制规范》[1]。坚七扭又名七七扭、坚漆等。除根外,畲族民间也常取檵木的茎入药。
  9.1.1 檵木属植物概述
  金缕梅科植物全世界共有27属约140种,主要分布于亚洲东部,也见于澳大利亚、北美、中美和马达加斯加。作为现代分布中心的亚洲,金缕梅科特别集中在中国南部,共有17属75种和16变种。现代金缕梅植物区是按系统发育划分为6个亚科,在中国均有代表,特别是它们当中代表原始类型的5个亚科8个属,全部产于中国或以中国为分布中心,甚至是中国特有的属。其中山铜材属(Chunia)是特有的单种属,半枫荷属(Semiliquidambar)是特有的寡种属。金缕梅科在地史上极为古老,从白垩纪及第三纪的地层中都发现过金缕梅科植物的化石。北欧及北美的白垩纪和第三纪有枫香树属(Liquidambar)、金缕梅属(Hamamelis)、西亚金缕梅属(Parrotia)以及和塞纪属(FothergiHa)的化石,在日本第三纪的地层有蜡瓣花属(Corylopsis)的化石,在北美的俄勒冈有马蹄荷属(Exbucklandia)的化石。本科植物全部是木本植物,其中如枫香树属、蕈树属(Altingia)、马蹄荷属、山铜材属、壳菜果属(Mytilaria)和半枫荷属的木材可供建筑及制作家具。药用的有枫香树属、蕈树属、半枫荷属、金缕梅属、牛鼻栓属(Forturearia)和蜡瓣花属。枫香树属及蕈树属的树脂还可以作为香料和定香原料。此外,大多数的属还具有观赏价值[2]。
  檵木属(Loropetalum)为常绿或半落叶灌木至小乔木,芽体无麟苞。叶互生,革质,卵形,全缘,稍偏斜,有短柄,托叶膜质。花4~8朵排成头状或短穗状花序,两性;萼筒倒锥形,与子房合生,外侧被星毛,萼齿卵形,脱落性;花瓣带状,白色,在花芽时向内卷曲;雄蕊周围着生,花丝极短,花药有4个花粉囊,瓣裂,药隔突出;退化雄蕊鳞片状,与雄蕊互生;子房半下位,2室,被星毛,花柱2个,胚珠每室1个,垂生。蒴果木质,卵圆形,被星毛,上半部2片裂开,每片2浅裂,下半部被宿存萼筒所包裹,并完全合生,果梗极短或不存在。种子1个,长卵形,黑色,有光泽,种脐白色;种皮角质,胚乳肉质。檵木属有4种和1个变种,分布于亚洲东部的亚热带地区,其中我国有3种和1个变种。
  9.1.2 坚七扭基原植物形态、鉴别与资源分布
  9.1.2.1 基原植物形态
  檵木为灌木,有时为小乔木,多分枝,小枝有星毛。叶革质,卵形,长2~5cm,宽1.5~2.5cm,先端尖锐,基部钝,不等侧,上面略有粗毛或秃净,干后暗绿色,无光泽,下面被星毛,稍带灰白色,侧脉约5对,在上面明显,在下面突起,全缘;叶柄长2~5mm,有星毛;托叶膜质,三角状披针形,长3~4mm,宽1.5~2mm,早落。花3~8朵簇生,有短花梗,白色,比新叶先开放,或与嫩叶同时开放;花序柄长约1cm,被毛;苞片线形,长3mm;萼筒杯状,被星毛,萼齿卵形,长约2mm,花后脱落;花瓣4片,带状,长1~2cm,先端圆或钝;雄蕊4个,花丝极短,药隔突出成角状;退化雄蕊4个,鳞片状,与雄蕊互生;子房完全下位,被星毛;花柱极短,长约1mm;胚珠1个,垂生于心皮内上角。蒴果卵圆形,长7~8mm,宽6~7mm,先端圆,被褐色星状绒毛;萼筒长为蒴果的2/3。种子圆卵形,长4~5mm,黑色,发亮。花期3~4月。
  9.1.2.2 鉴别
  1)坚七扭的粉末显微特征
  本品粉末浅褐色。木纤维极多,成束,淡黄色,壁厚,直径20~50um,大多数纤维束中间具有分隔。有的纤维束周围的细胞中,含有草酸钙方晶,形成晶纤维。草酸钙方晶呈长方形,类方形,直径10~30um。石细胞淡黄色,类长方形,直径10~40um。木栓细胞表面观呈多角形,壁薄(图9-1)。
  2)坚七扭的薄层色谱(图9-2)
  9.1.2.3 资源分布
  檵木主要分布于我国中部、南部和西南各省,也见于日本和印度。喜生于向阳的丘陵和山地,也常出现在马尾松林及杉木下,是一种常见的灌木,唯在北回归线以南未见它的踪迹。
  红花檵木(Loropetalumchinensisvar.rubrum)为檵木的天然突变种,叶与原种相同。花紫红色,长2cm。分布于湖南长沙岳麓山,多属栽培。
  9.1.3 檵木的繁殖与栽培
  檵木一年内多次抽梢、开花,地栽能耐-12℃低温,耐43℃高温。适宜在肥沃、湿润的微酸性土壤中生长。
  9.1.3.1 繁殖方法
  1)种子繁殖
  选择9~10年生长健壮的成年植株,于9月下旬~10月上旬,蒴果尚未开裂时,分批采摘,采后去壳取种播种,秋冬播于11~12月进行,春播以3月上旬为好。播前温水浸种1~2天,或用0.05%的赤霉素浸种30min。选排水良好、土壤肥沃疏松的沙壤黄壤地作畦,畦宽1.2m,畦高13cm,按株行距5cm×lOcm点播,播后覆盖黄土细沙,厚度1.5cm,上加盖丝茅草。一般25天左右出苗,期间注意立枯病的防治。当苗生长到15cm时,即可移栽。生长2~3年便可开花,5~6年后结果”有性繁殖因其苗期长,生长慢,且有白花檵木苗的出现(返祖现象),一般不用于苗木生产,而用于红花檵木育种研究。
  2)扦插繁殖
  选择排水良好、阳光充足、土层深厚、肥沃的田土或旱土,作成宽1.5m、高10cm、长随地势的插床。基质以50%细黄泥、10%潮沙泥、40%砻糠灰混合为好。从健壮的母株上选取粗壮饱满、发育充实、节部隆起、芽眼明显突出的枝条。按枝条木质化程度,可分为嫩枝扦插、硬枝扦插和老枝扦插三种类型。插条一般4~5个节,长约10cm,保留上部1~2片叶,基部削成马耳形。然后在0.03%的萘乙酸或0.03%~0.05%的吲哚乙酸等生根剂中处理5~30min,随即插入湿润的基质中,入土深度为插穗长的1/2~2/3。插后用细孔洒水壶充分浇水,然后盖薄膜密封,保持棚内高温、高湿及适当的光照和透气。20~30天后,从插条的下端伤口部产生愈伤组织,其上萌生出大量小根,并在棚内抽梢展叶,50天以后发根达90%以上,这时可揭去薄膜。一般当年苗高15~20cm,并有2~3个分枝,即可移栽。
  3)嫁接繁殖
  红花檵木与檵木之间的亲和力特别强。多采用嫁接方法来制作红花檵木盆景和大规格的红花檵木绿化苗木。常用的方法如下。
  (1)嫁接。以春秋季嫁接为宜。在健壮母树中上部选取芽体充实饱满、有一定粗度的一年生或当年生枝条,每个接穗视节间长短一般以2~3芽、总长度2~2.5cm为好。选扁平的一面为长削面,将皮层微带木质部削去,长度1.5~1.6cm,倾斜约15°。短削面在长削面的反面,长度为长削面的1/3,倾斜约60°。砧木截枝要求截口平滑,并略向一边倾斜。先在低斜的一边向上打一角刀,然后齐木质部纵切一刀,长1.5~1.6cm,再将削好的接穗长削面向内对准形成层插入,如砧穗比差较大,须对准一边形成层。再用带状薄膜缠扎,接穗上部套上薄膜袋。当砧木比接穗大许多倍时,可采用泥团法封口,即接后用薄膜带缠缚,但不封顶,再在砧穗接合处,将湿润的细黄土捏成长椭圆泥团,用长17cm(5寸),宽13cm(4寸)的薄膜严密包裹,上缠绳线,仅露数叶于泥团外。使接穗在泥团中与外界高热干燥的气候隔绝,提高成活率,延长嫁接期。
  (2)芽接。此法常在夏秋季进行,通用的芽接有T形和H形。在选好的接芽部位,划成T形或H形,深达木质部,轻轻挑开皮层,使其与木质部分离,随即在接穗的枝条上,切去该芽下方的叶片,仅留叶柄,将接芽削成微带木质的盾形芽片,长1~1.2cm,然后嵌入砧木上T形或H形的切口中,缠缚时留叶柄于外。经过7~8天,以指轻触叶柄,随即脱落,说明嫁接已经成活。嫁接苗的管理:成活后解开缠绕薄膜,及时抹除萌蘖和断砧,加强松土除杂草管理,注意排水和干旱季节的灌溉,适时适当施肥,并根据需要进行初步摘心整形。
  4)高压繁殖
  红花檵木植株上发现芽变时,或利用红花檵木粗壮枝条培养小、微型盆景的小桩坯时,常用到泥套袋+生根粉(ABT)环剥高压法。在4月中旬,环剥宽度为高压枝直径的3~5倍,ABT浓度为0.005%,所套薄膜泥袋直径为高压枝直径的3~5倍,高度长于环剥宽度6~8cm,套袋上部扎紧,严防雨水浸入。当年10月切取,栽入圃地,成活率80%~90%。
  9.1.3.2 栽培与管理
  1)整地作畦
  将底土进行翻耕,深20~30cm,打碎土块,清除石块、瓦片、残根及杂草等。红花檵木小苗采用厢式栽培,厢面高出地面20cm,苗床宽1.2m,长度视地势而定。每两厢之间设宽40cm的步行道,每厢外侧设一条20cm×20cm的排灌水沟,整个地块在周边设40cm×30cm的排灌水沟。
  2)苗木移栽
  起苗应在土壤湿润的状态下进行,起苗前3h充分洒水,使湿润的土附在根群上,避免根群受伤。起苗时做到边起边栽,勿使其长期暴露于强光下。如需长途运输,苗木根部要打稀泥浆,并用塑料袋包紧。整个地块栽完后,及时灌水。栽苗季节以10月上旬~12月中旬和2月上旬~3月下旬为好,12月下旬~1月下旬易产生冻害,4月以后栽苗因光照强、气温高会影响成活。栽植可分沟植或穴植,每亩栽1~1.5万株。裸根移植应将根系舒展于穴内,勿使其卷曲,上盖细土,稍稍提动,使根群舒展,再轻轻压实,浇足压蔸水,再盖一层表土保墒。秋季栽植应避免冬季受冻,当气温降至0℃
  以下时,要采取防寒措施,一般是在苗床上铺盖干草、落叶,也可拱盖薄膜。
  3)田间管理
  苗木栽植后,应注意浇水。以河水、湖水和池塘水为好,避免直接用井水。随栽随灌第一次水,栽后3天灌第二次水,再经5~6天灌第三次水。在干旱季节,要依土壤结构及干旱时间长短及时灌水。一般轻沙土灌水次数宜多,黏质土可适当少些,有夜潮水的沙壤土也可少灌。
  4)中耕除草
  中耕除草能促进苗木根系对养分的吸收,中耕深度依苗木根系的深浅及生长时期而定。幼苗小苗中耕宜浅,中苗大苗宜深;近植株根部宜浅,株间行间宜深,一般以3~5cm为好。中耕除草常在5~6月进行,7月以后苗木根系已扩大到株行间,要停止中耕,否则将切断根群,使苗木受损。
  5)适当施肥、适时追肥
  施肥应以氮、磷、钾三种营养成分配合使用,多用有机肥或颗粒复合肥。一般抨插小苗每亩用量氮、磷、钾的配比为13kg:13kg:lOkg。在生长的不同时期,要常追肥,每亩用肥量为:出圃苗龄2~3年的施硝酸铉7.5kg、过磷酸钙10kg、氯化钾3.5kg;出圃苗龄4~5年的施硝酸铉6kg、过磷酸钙5kg、氯化钾2kg。干施追肥时,应在施后立即灌水,追施人粪尿时必须充分腐熟。2~3年生出圃的红花檵木球类,追肥目的是促进枝叶生长,氮肥可多施,但在秋季苗木生长后期,应增施磷钾肥。追肥除粪干、人粪尿外,也可追施腐熟的猪粪尿,对红花檵木有催红作用。
  9.1.3.3 病虫害防治
  1)病害
  立枯病主要在春季雨水多时发生,幼苗和成株均受危害。受害处产生暗褐色病斑,严重时成片死亡。防治方法:用无病新土移栽,使用的肥料一定要腐熟,绝不能用新鲜农家肥。及时清除病株。移栽前每平方米用40%甲醛50mL兑水6kg进行土壤消毒,或用70%五氯硝基苯酚按1:30的比例拌细土,撒于苗床土上。春栽小苗一星期后喷70%甲基托布津1000倍液或75%百菌清1000倍液,每10天喷施1次,交替使用。
  2)虫害
  主要虫害有蚜虫、尺蛾、黄夜蛾、盗盼夜蛾、大小地老虎及金龟子等。螃虫会影响植物生长,诱发煤污病;尺蛾、夜蛾以幼虫食叶为害,严重时2~3天可吃光全部嫩梢,地老虎和金龟子以幼虫蛀食根系,地老虎主要危害扦插苗和幼苗,金龟子大、中、小苗均危害。防治蚜虫可于萌芽前喷5%柴油乳剂或3~5波美度石硫合剂,杀死越冬成虫和虫卵。落花后喷第二次药,秋季10月间喷第三次药。防治尺蛾、夜蛾幼虫可用50%甲胺磷1500倍液喷施,要治早、治小。地老虎和金龟子的幼虫为地下害虫,防治方法是加强苗圃管理,不施未腐熟的有机肥。冬季翻耕,将越冬幼虫翻到地表冻死。用3%呋喃丹颗粒剂,按每亩用2kg,开沟施入10~20cm深的土中。
  9.2 典籍记载与应用
  9.2.1 畲医药典籍记载
  【药材性状】根圆柱形,拐枝状不规则弯曲或不规则分支状,长短粗细不一。表面灰褐色或黑褐色,具浅纵纹,有圆形茎痕及须状侧根;栓皮易呈片状剥落而露出棕红色的皮部。体重,质坚硬,不易折断,断面灰黄色或棕红色,强纤维性。
  叶多皱缩卷曲,完整叶展平后卵形,长1.5~2cm,宽0.8~2.5cm,先端尖锐,基部稍偏斜,全缘或有微锯齿,上面灰绿色或浅棕色,下面色较浅,两面疏被短绒毛,叶柄被棕色短毛。
  花常3~8朵簇生,基部有短总花梗。脱落的单花朵常皱缩呈条带状,长1~2cm,浅黄色或浅棕色;湿润展平后,花萼筒杯状,长5mm,4裂,萼齿卵形,表面有灰白色星状毛,花瓣4片,条状或倒卵状匙形,浅黄色,有明显的棕色羽状脉纹,雄蕊4枚,花丝极短,与鳞片状退化雄蕊互生,子房下位,花柱极短,柱头2裂。质柔韧。
  【性味】根:气微,味淡,微苦涩。叶:气微,味涩、微苦。以色绿者为佳。花:气微清香,味淡微苦。以气清香,色淡黄气者为佳。
  【功效】修复组织损伤,抗氧化活性,抑菌作用。
  【主治】痔疮,崩漏,止血。
  【用法用量】根:内服煎汤20~50g;外用适量。叶:内服煎汤15~30g,或鲜用捣汁;外用适量;煎水外洗适量。花:内服煎汤6~15g;外用适量。
  【附方】①痔疮:檵木嫩叶适量,研成细粉,外敷。②崩漏:檵木叶50g,加水煎成200mL,一次服完,次日服参类补品。③崩漏:檵木须根15g,乌脚鸡9g,水煎服,每日1剂。④产后出血:檵木根15g,海金沙6g,地骨皮9g,益母草6g,龙须草9g,水煎服。⑤刀伤出血:檵木叶适量,嚼碎外敷患处。
  9.2.2 其他医药典籍记载和民间应用
  传统医药文献中有部分关于檵木药用价值的记载,《闽东本草》云:“性平,味微甘涩”,归经“入肺、脾、胃、大肠四经”。《植物名实图考》描述其:“捣烂敷刀刺伤,能止血”。《湖南药物志》《浙江天目山药植志》《江西民间草药》等记录檵木的功能主治包括清暑、解热、止咳、止血以及治疗遗精、烦渴、鼻衄、血痢、泄泻、妇女血崩等症。
  依据传统中医及现代医学研究,檵木根、叶、花、果均能入药,可发挥通经活络、收敛止血、清热解毒、止泻等功效。
  9.3 化学成分研究
  9.3.1 檵木属植物的化学成分研究
  研究表明,檵木属植物的黄酮类化合物、没食子酸和鞣质成分具有良好的药用价值。黄酮类化合物如甘草总黄酮提取物可降低高血脂的发病率,黄酮单体对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌等有很好的抑制作用;没食子酸可以抑制鸟昔酸脱羧酶的促癌作用,可直接杀伤肿瘤细胞,还能抑制肿瘤血管的生长;鞣质也具有广泛的药理活性,如保护消化器,治疗胃肠道出血、溃疡和水泻等。表9-1归纳了檵木属植物中所获得的化学成分及其植物来源信息。
  9.3.2 檵木的化学成分研究
  目前据研究报道,从檵木和红花檵木中分离鉴定出了50余个化合物,结构类型包括鞣质、黄酮、木脂素类和萜类等。
  9.3.2.1 挥发油
  杨鑫宝等[13]应用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对通过水蒸气蒸馆所得的檵木花挥发油成分进行分析,鉴定了其中的19个化合物。结果表明,烷烃类是檵木花挥发油的主要化学成分,其中十五烷的相对含量达21.12%。王金梅等[14]采用顶空固相萃取和GC-MS联用技术对红花檵木的花和叶挥发性成分进行分析,从花和叶中分别鉴定出26个和29个化合物。研究结果表明,花和叶主要的挥发性成分相似,均为烷烃类、醛类和萜类化合物,其中十五烷和醛类化合物的含量,花中明显高于叶中。唐华等[3]采用GC-MS联用技术,对通过索氏提取法所得的檵木叶、红花檵木绿叶和红花檵木红叶中的脂肪酸成分进行分析,从上述3种叶片中分别鉴定出19种、14种和16种脂肪酸,含量较高的成分为油酸、亚油酸、棕榈酸、硬脂酸和山嵛酸。
  93.2.2 鞣质
  按化学结构特征,鞣质可分为可水解鞣质(hydrolysabletannins),缩合鞣质(condensedtannins)和复合鞣柔质(complextannins)。Yoshida等[11]曾报道了檵木叶中20种可水解鞣质的分离鉴定,包括3种奎尼酸衍生物:3-0-顺-对香豆酰奎尼酸(1)、3-0-反-对香豆酰奎尼酸(2)和绿原酸(3);5种没食子酸葡萄糖苷:1,2,6-三-O-没食子酰-β-D-葡萄糖苷(4)、1,3,4,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖苷(5)、1,2,3,6-四-0-没食子酰-β-D-葡萄糖苷(6)、1,2,3,4,6-五-0-没食子酰-β-D-葡萄糖苷⑺和2-O-二没食子酰-1,3,4,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖苷(8);4种鞣花鞣质单体:tellimagrandinl(9)、tellimagrandinⅡ(10)、geminD(ll)和rμgosinA(12);5种鞣花鞣质二聚体:rμgosinE(13)、rμgosinD(14)、loropetalinA(15)、loropetalinC(16)和camelliinB(17);3种鞣花鞣质三聚体:prostratinB(18)、loropetalinB(19)和rμgosinG(20),其中loropetalinA、loropetalinB、loropetalinC是从檵木叶中分离鉴定的3个新的鞣质类化合物。化合物1~20的化学结构见图9-3。
  9.3.2.3 黄酮
  黄酮是檵木叶中另一类含量较高的物质,檵木黄酮苷元的结构类型主要是黄酮醇,包括槲皮素、山柰酚和杨梅素等;苷元所连接的糖的种类主要为葡萄糖、半乳糖和鼠李糖等,糖上的羟基往往被没食子酰基或香豆酰基酰化。Okuda等从[5]木叶中分离得到杨梅苷(21)和杨梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷(22)。刘延泽等[6]从檵木叶中分离得到木犀草素(23)和没食子酰黄酮苷D(24)、黄芪苷2′-O-没食子酸酯(25)和黄芪6′-O-没食子酸酯(26)。王刚等⑺从檵木的茎叶中分离得到椴树苷(27)。伏晓等[8]红花檵木叶中分离鉴定了5个黄酮类化合物,分别是杨梅苷(21)、山柰酚(28)、槲皮素(29)、杨梅素(30)和异槲皮苷(31)。游璐茜[4]从檵木叶中分离鉴定了杨梅素-3-0-β-D-半乳糖苷(32)、槲皮素-3-0-β-D-半乳糖苷(33)、山奈酚-3-0-β-D-半乳糖苷(34)和山奈酚-3-0-β-D-葡萄糖苷(35)。化合物21~35的化学结构见图9-4。
  9.3.2.4 木脂素
  目前从檵木中分离鉴定了4个木脂素类化合物,其中包括1个芳基四氢萘类木脂素(一)-(7R,8S,8′S-lyoniresiol)(36)[12],1个双四氢呋喃类木脂素(+)-丁香树脂酚(37)[12],2个新木脂素methyl-(7R,8R)-4-hydroxy-8′,9′-dinor-4′,7′-epoxy-8,3′-neolignan-7′-ate(38)[7]和4-(4-羟基-3-甲氧苯基)-1-(4-羟苯基)-2,3-二甲基丁基-1-酮(39)[12]。化合物36~39的结构式见图9-5。
  9.3.2.5 萜类和甾体
  王刚等[7]的从檵木中分离得到2个黏霉烷型五环三萜3β-hydroxyglutin-5-ene(4O)和3a-hydroxyglutin-5-ene(41),2个甾体类化合物β谷甾醇(42)和β-胡萝卜苷(43)以及无环二萜植物解(44)和补身烷型倍半萜落叶松树脂酸(45)。化合物40~45的化学结构见图9-6。
  9.3.2.6 其他化学成分
  王刚等[7]从檵木中分离得到14-甲基十五烷酸甘油酯(46)、反式对香豆酸乙酯(47)。周小江等[12]从檵木叶中分离得到4-甲氧基苯酚(48)、a-生育酚(49)和姜酮(50)。化合物46~50的化学结构见图9-7。
  9.4 药理活性研究
  现代药理实验表明,畲药坚七扭的檵木和红花檵木植物主要具有抑菌、抗炎、促愈合和抗氧化等生物活性。
  9.4.1 抑菌活性
  周国海等[15]将红花檵木叶以60%乙醇回流提取2h,所得提取物分别以石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取得到不同极性部位,采用纸片法对总提取物及各个不同极性部位的抑菌活性进行了评价。结果表明乙酸乙酯萃取部位的活性最好,对于大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、痢疾志贺菌,其抑菌直径分别为16.0mm、16.7mm和14.6mm,效果均优于阳性对照药四环素。
  吴振等[16]可采用琼脂糖二倍稀释法考察了檵木总多酚体外对金黄色葡萄球菌、酿脓链球菌、大肠杆菌的最低抑菌浓度(minimuminhibitoryconcentration,MIC)值,檵木总多酚对金黄色葡萄球菌和酿脓链球菌的MIC值均为3g/L。李雪松等[17]采用琼脂糖二倍稀释法考察了从檵木叶分离得到的新木脂素4-(4-羟基-3-甲氧苯基)-1-(4-羟苯基)-2,3-二甲基丁基-1-酮对金黄色葡萄球菌、酿脓链球菌、大肠杆菌的MIC,其MIC值分别为5.0mg/L、10.0mg/L和30.0mg/L。
  9.4.2 抗炎活性
  吴振等[16]采用二甲苯致小鼠耳肿胀炎症模型考察了檵木总多酚的抗炎作用,结果表明檵木总多酚在50~100mg/kg的剂量范围对小鼠耳肿胀具有很好的抑制活性,且具有一定的量效关系,檵木总多酚以50.0mg/kg和100.0mg/kg剂量连续5天灌胃给药的肿胀抑制率分别为44.0%和50.7%。李雪松等[17]研究发现化合物39在2.5mg/L的剂量水平能明显抑制小鼠巨噬细胞样细胞株RAW264.7的一氧化氮释放。
  9.4.3 促愈合作用
  刘浩元等[18]采用大鼠皮肤割伤模型和切除伤模型考察了檵木的促皮肤愈合作用。在大鼠皮肤割伤模型中,以1%檵木提取物溶液涂抹,造模10天后撕裂张力与空白组相比有显著性提升,优于相同浓度下的阳性对照药呋喃西林。在大鼠皮肤切除伤模型中,同样以1%檵木提取物溶液涂抹,涂药3天后伤口愈合32%(同期空白组伤口愈合了14.5%),至第15天伤口基本愈合,在此期间檵木组伤口愈合速度一直快于空白组,略优于阳性药呋喃西林。此外,伤口结疤脱落时间、伤口面积、伤口新生皮肤组织苏木精-伊红染色和免疫组化染色等结果均表明檵木提取物可以显著加速伤口愈合。
  9.4.4 抗氧化作用
  潘晓军等[19]研究了檵木花75%乙醇提取物的体外抗氧化活性,提取物浓度为27.84mg/L时,对DPPH自由基的清除率为50%,并且随浓度的增加清除作用增强。
  9.4.5 其他作用
  周小江[20]公开了一种檵木叶总黄酮提取物的制备方法,对于链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠,以200mg/kg的剂量给予该提取物,可明显改善大鼠的糖尿病性视网膜病变症状;体外评价结果表明,该提取物能够扩张大鼠冠状动脉,增加冠脉血流量,减慢心率,其作用呈量效关系;该提取物在100~
  400mg/kg的剂量范围内给药,能延长实验性脑缺血大鼠的生存时间,对脑缺血有明显保护作用。
  9.5 研究实例
  根据相关报道的文献,阐述红花檵木叶中黄酮类化学成分的分离与鉴定的实例[8]。
  9.5.1 实验材料
  红花檵木叶采集于河南信阳市潢川县卜集镇,经笔者鉴定为金缕梅科檵木属植物红花檵木,标本存放于河南中医学院。
  9.5.2 化合物的提取与分离
  取干燥红花檵木叶3kg,粉碎后以8倍量70%乙醇回流提取3次,每次提取1h,合并提取液减压浓缩,得浸膏310g。取浸膏300g溶解于3L蒸馏水中,加热溶解,取上清液上于D101大孔树脂柱,先用水洗脱,除去多糖类成分,再以不同浓度的乙醇(30%、50%、70%、100%)梯度洗脱,收集50%和70%乙醇洗脱部分。70%乙醇洗脱部分经硅胶柱色谱、氯仿-甲醇梯度洗脱、薄层色谱(TLC)指导合并相同馏分,再经反复SephadexLH-20凝胶色谱纯化,得到化合物A和、B。50%乙醇洗脱部分经硅胶柱色谱、氯仿-甲醇梯度洗脱、TLC指导合并相同馏分.再经反复SephadexLH-20凝胶色谱和RP-ODS色谱纯化,得到化合物C~E。
  9.5.3 化合物的结构鉴定
  化合物A:黄色粉末,盐酸镁粉反应呈阳性,Molish反应显阴性;UV(MeOH)Anax:367nm、266nm。ESI-MSm/z.285[M-H];1H-NMR(6OOMHz,DMSO-d6)δ.12.47(1H,s,OH-5),8.03(2H,d,J=8.9Hz,H-2′,6′),6.92(2H,d,J=8.9Hz,H-3′,5′),6.41(1H,d,J=1.8Hz,H-8),6.17(1H,d,J=1.8Hz,H-6);13C-NMR(DMSO-d6,150MHz)。δ:175.8(C-4),163.8(C-4′),160.6(C-8a),159.1(C-7),156.2(C-5),146.7(C-2),135.6(C-3),129.4(C-2′,6′),121.7(C-1′),115.3(C-3′,5′),103.0(C-4a),93.4(C-8),98.2(C-6),以上NMR数据与文献中山柰酚数据[21]对照一致,故确定化合物A为山柰酚。
  化合物B:黄色粉末,盐酸镁粉反应呈阳性,Molish反应显阴性;UV(MeOH)Amax:370nm、55nm。ESI-MSm/z:301[M-H]-;1H-NMR(600MHz,DMSO-d6)δ:12.50(1H,s,OH-5),9.38(3H,s,OH-3,3′,4′),7.68(1H,d,J=2.0Hz,H-2′),7.54(1H,dd,J=2.0Hz,8.4Hz,H-6′).6.88(1H,d,J=8.4Hz,H-5′).6.40(1H.d,J=1.8Hz,H-8),6.18(1H,d,J=1.8Hz,H-6)。以上NMR数据与文献中槲皮素数据[22]对照一致,故确定化合物B为槲皮素。
  化合物C:淡黄色粉末,盐酸镁粉反应呈阳性,Molish反应显阴性;UV(MeOH)max373nm、254nm。ESI-MSm/z:317[M-H]。1H-NMR(DMSO-d6600MHz)δ:12.50(1H,s,OH-5),6.18(1H,d,J=1.9Hz,H-6),6.37(1H,d,J=1.9Hz,H-8),7.24(2H,s,H-2′,6′);13C-NMR(DMSO-d6,150MHz)δ146.9(C-2),l35.9(C-3),175.8(C-4),160.8(C-5),98.3(C-6),163.9(C-7),93.3(C-8),156.2(C-8a),102.9(C-4a),120.8(C-l′),107.2(C-2′,6′),145.8(03′),135.9(C-4′),145.8(C-5′)。以上NMR数据与文献中杨梅素数据[23]对照基本一致,故确定化合物C为杨梅素。
  化合物D:淡黄色粉末,盐酸镁粉反应呈阳性,Molish反应显阳性;UV(MeOH)zmax:256nm、358nm。ES1-MSm/z:453[M-H]-,1H-NMR(DMSO-d6,600MHz)δ:12.48(1H,s,OH-5),6.89(2H,s,H-2′,6′),6.36(1H,d,J=1.8Hz,H-8),6.19(1H,d,J=1.9Hz,H-6),5.20(1H,s,H-l″),0.84(3H,d,J=6.2Hz,CH3)。以上NMR数据与文献中杨梅素-3-0-a-L-鼠李糖苷数据[24]基本一致,故确定化合物D为杨梅素-3-0-a-L-鼠李糖苷。
  化合物E:淡黄色粉末,盐酸镁粉反应呈阳性,Molish反应显阳性;UV(MeOH)max:258nm、356nm。ESI-MSm/z:463[M-H]。1H-NMR(6OOMHz,DMSO-义位7.58(1H,dd,J=2.2Hz,9.0Hz,H-6'),7.57(1H,d,J=2.2Hz,H-2'),6.84(1H,d,•/=9.0Hz,H-5'),6.40(1H,d,J=
  2.1Hz,H-8),6.19(1H,d,J=2.1Hz,H-6),5.47(1H,d,J=7.3Hz,H-l"),3.08~3.58(6H,m);13C-NMR(600MHz,DMSO-/)£156.9(C-2),134.0(C-3),178.1(C-4),161.9(C-5),99.4(C-6),164.7(C-7),94.1(C-8),156.9(C-9),1O4.7(C-10),122.2(C-1′),115.9(C-2′),145.5(C-3′).148.9(C-4′),116.8(C-5′),121.9(C-6′),101.6(C-l″),74.8(C-2″),77.2(C-3″),70.6(C-4″),78.1(C-5"),61.7(C-6")。以上NMR数据与文献中异槲皮苷数据[25]对照一致,故确定化合物E为异槲皮苷。
  9.5.4 讨论
  综上,从红花檵木叶乙醇提取物中分离得到5个黄酮类化合物,采用波谱技术进行结构鉴定,分别为山奈酚、檵皮素、杨梅素、杨梅素-3-O-a-L-鼠李糖昔和异槲皮苷,所有化合物均为首次从该植物中分离得到。红花檵木中主要的活性物质为多酚类、鞣质类和香豆素类化合物[15],黄酮是一类具有广泛药理活性的多酚化合物,包括抗氧化、抗炎、抗诱变、抗肿瘤形成与生长等多种药理活性[26,27]。大孔树脂对黄酮类成分具有很好的分离富集作用,广泛应用于黄酮类成分的分离纯化中[28],故前期采用大孔树脂柱来进行分离。本实验结果可为红花檵木的进一步开发利用提供科学依据。
  9.6 炮制和质量标准
  9.6.1 坚七扭的炮制
  取原药,除去杂质,洗净,润软,切段或块片,干燥。
  9.6.2 坚七扭的质量标准
  经研究表明,可通过鉴别(粉末显微特征、薄层色谱)、检查(水分、灰分)、浸出物、含量测定对坚七扭的质量进行全面的控制。
  9.6.2.1 坚七扭的检查
  1)坚七扭的水分
  水分按《中国药典》水分测定法中的烘干法检查。根据测定结果(表9-2),将水分限度定为不得过12.0%。
  2)坚七扭的总灰分
  总灰分按《中国药典》灰分测定法中的总灰分测定法检查。根据测定结果(表9-2),将总灰分限度定为不得过6.0%。
  3)坚七扭的浸出物
  浸出物按《中国药典》醇溶性浸出物测定法项下的热浸法检查。根据测定结果(表9-2),用50%乙醇作溶剂,将浸出物的限度定为应不得少于8.5%。
  9.6.2.2 坚七扭的含量测定
  现代临床研究表明,坚七扭的主要化学成分为没食子酸,没食子酸具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤等作用。这与畲药的理论与应用相吻合。故选用没食子酸为檵木根的指标性成分测定其含量(表9-2)。
  检测波长的选择:取没食子酸对照品的溶液,用HPLC-DAD检测,在波长200~400nm范围扫描,经DAD光谱分析,结果以216nm波长处的吸收度值和峰形为优,故选用216nm作为检测波长。
  流动相的确定:比较了甲醇-0.1%磷酸(10:90,体积比)、甲醇-0.4%磷酸(3:97)、甲醇-0.3%磷酸(2:98)等三种流动相,结果以甲醇-0.3%磷酸(2:98)分析效果较优,故选用此作为流动相。
  样品的提取:对提取溶剂、提取方法分别做了考察,以没食子酸的得率作为指标,结果是5%盐酸水浴中水解提取〉用水煎煮提取>30%甲醇加热回流提取>30%甲醇超声提取。考察盐酸的酸度(2%、5%、10%)和提取的时间(2h、3h、4h)对测定结果的影响,结果发现以5%盐酸溶液提取效果最优,水浴中水解4h,提取完全。因此,本实验选用5%盐酸溶液水浴中水解4h为样品的提取方法。
  1)仪器与试药
  Agilent1260高效液相色谱仪(美国安捷伦科技有限公司);G4212B二极管阵列检测器(美国安捷伦科技有限公司);电子天平(XS105DU,瑞士梅特勒公司);水浴锅(HH-4,上海梅香仪器公司)。
  甲醇为色谱纯(Merck),盐酸、磷酸为分析纯,水为娃哈哈纯净水。没食子酸对照品(批号:110831-201204,含量89.9%,使用前无需处理),购自中国药品生物制品检定所。
  2)色谱条件
  色谱柱:AgilentSB-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5uym)(美国安捷伦科技有限公司);流动相:甲醇-0.3%磷酸溶液(2:98),流速1.0mL/min;柱温:30℃;检测波长:216nm;自动进样,进样量:5μL。
  3)对照品溶液的制备
  精密称取没食子酸对照品适量,用50%甲醇稀释成每1mL含没食子酸30μg的对照品溶液。
  4)供试品溶液的制备
  药材粉碎,过二号筛,取约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入5%盐酸溶液50mL,密塞,称定质量,水浴中加热水解4h,放冷至室温,再称定质量,用5%盐酸溶液补足减失的质量,摇匀,过滤,精密量取续滤液5mL置10mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,用0.45um微孔滤膜过滤,取续滤液,即可。
  5)系统适应性实验
  分别精密吸取“3)、4)”项下溶液,按“2)”项下色谱条件进样,记录色谱图,见图9-8。由图可见,在该色谱条件下,没食子酸与其他成分可达到基线分离,分离度大于1.5,理论塔板数在8000以上,分离效果较好。
  9.7总结与展望
  檵木植物具有良好的药用价值,并作为民间草药使用历史悠久。《植物名实图考》中记载,檵木舒筋活血,解热止泻,治肚痛、闪筋、水泻、胼胝、外伤出血;《湖南药物志》中记载,檵木治中暑、喉痛、风热目痛。其变种红花檵木也是重要的民间药用资源,具有综合开发价值。
  目前,对檵木的研究范围较局限,对功能成分的研究主要集中在黄酮类化合物方面,而关于红花檵木中有效成分的研究也仅限于花色素提取、抗菌性研究以及叶中黄酮种类和总黄酮量的测定。在今后的科研中,可对檵木属其他种植物、檵木和红花檵木植物的其他部分(根、果等器官)以及其他生物活性分开展深入研究。
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知识出处

整合畲药学研究

《整合畲药学研究》

出版者:科学出版社

本书整合了常用畲药的植物资源、栽培、功能主治、临床应用、化学成分、药理活性、质量标准、产地加工与饮片炮制等诸多方面内容。全书收录常用畲药186种,包括重点介绍的11种收载于2015年版《浙江省中药炮制规范》的最常用畲药和27种次常用畲药。

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