宁德市图书馆 内容
分光光度法是光谱法的重要组成部分，是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内的吸光度或发光强度，对该物质进行定性和定量分析的方法。常用的技术包括紫外-可见分光光度法、红外分光光度法、原子吸收分光光度法、荧光分光光度法等。
（一）紫外-可见分光光度法
紫外-可见分光光度法是在190～800mn波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时，物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此，通过测定物质在不同波长处的吸光度，并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。
从吸收光谱中，可以确定最大吸收波长ymax就和最小吸收波长;Imin。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。因此，可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较，或通过确定最大吸收波长，或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。用于定量时，在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度，并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。
紫外-可见分光光度法不仅能测定有色物质，对有共轭双键等结构的无色物质也能测定，具有灵敏、准确、简便等特点。畲药中含有紫外吸收的成分或本身有颜色的成分，在一定浓度范围内，其溶液的吸光度与浓度符合朗伯-比尔定律，均可以采用该方法进行分析。有些成分本身没有吸收，但加入合适的显色试剂显色后也可釆用此法测定。该法适合用于测定畲药中的大类成分，如总黄酮、总蔥醌、总皂苷的测定。
仪器的校正和检定、对溶剂的要求、测定法等内容参见《中国药典》四部通则0401“紫外-可见分光光度法
（二） 红外光谱法
1.红外分光光度法
红外分光光度法是在4000～400cm-1’波数范围内测定物质的吸收光谱，用于化合物的鉴别、检查或含量测定的方法。除部分光学异构体及长链烷烴同系物外，几乎没有两个化合物具有相同的红外光谱，据此可以对化合物进行定性和结构分析；化合物对红外辐射的吸收程度与其浓度的关系符合朗伯-比尔定律，是红外分光光度法定量分析的依据。
制备及测定供试品时，通常釆用压片法、糊法、膜法、溶液法和气体吸收法等进行测定。对于吸收特别强烈或不透明表面上的覆盖物等供试品，可采用如衰减全反射、漫反射和发射等红外光谱方法。对于极微量或需微区分析的供试品，可釆用显微红外光谱方法测定。除另有规定外，应按照国家药典委员会编订的《药品红外光谱集》各卷收载的各光谱图所规定的方法制备样品。具体操作技术参见《药品红外光谱集》的说明。仪器及其校正、供试品的制备及测定等内容参见《中国药典》四部通则0402“红外分光光度法”。
2.近红外分光光度法
近红外分光光度法是通过测定物质在近红外光谱区（波长范围在780～2500nm，按波数计为12800～4000cmT）的特征光谱并利用化学计量学方法提取相关信息，对物质进行定性、定量分析的一种光谱分析技术。近红外光谱主要由C—H、N—H、O—H和S-H等基团基频振动的倍频和合频组成，由于其吸收强度远低于物质中红外光谱（4000～400cm-1）的基频振动，而且吸收峰重叠严重，因此通常不能直接对其进行解析，而需要对测得的光谱数据进行数学处理后，才能进行定性、定量分析。
近红外分光光度法具有快速、准确、对样品无破坏的检测特性，不仅能进行“离线”分析，还能直接进行“在线”过程控制；不仅可以直接测定原料和制剂中的活性成分，还能对药品的某些理化性质如水分、脂肪类化合物的羟值、碘值和酸值等进行分析；并能对药物辅料、中间产物以及包装材料进行定性和分级。
近红外仪器装置、测量模式、影响因素、应用近红外分光光度法进行定性、定量分析的基本要求、模型验证、模型传递等内容参见《中国药典》四部指导原则9104“近红外分光光度法指导原则”。
（三）原子吸收分光光度法
原子吸收分光光度法的测量对象是呈原子状态的金属元素和部分非金属元素，是基于测量蒸气中原子对特征电磁辐射的吸收强度进行定量分析的一种仪器分析方法。原子吸收分光光度法遵循分光光度法的吸收定律，一般通过比较对照品溶液和供试品溶液的吸光度，计算供试品中待测元素的含量。原子吸收分光光度法是目前用于分析畲药中微量元素的重要方法之一。对仪器的一般要求、测定法等内容参见《中国药典》四部通则0406“原子吸收分光光度法”。
（一）紫外-可见分光光度法
紫外-可见分光光度法是在190～800mn波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时，物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此，通过测定物质在不同波长处的吸光度，并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。
从吸收光谱中，可以确定最大吸收波长ymax就和最小吸收波长;Imin。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。因此，可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较，或通过确定最大吸收波长，或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。用于定量时，在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度，并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。
紫外-可见分光光度法不仅能测定有色物质，对有共轭双键等结构的无色物质也能测定，具有灵敏、准确、简便等特点。畲药中含有紫外吸收的成分或本身有颜色的成分，在一定浓度范围内，其溶液的吸光度与浓度符合朗伯-比尔定律，均可以采用该方法进行分析。有些成分本身没有吸收，但加入合适的显色试剂显色后也可釆用此法测定。该法适合用于测定畲药中的大类成分，如总黄酮、总蔥醌、总皂苷的测定。
仪器的校正和检定、对溶剂的要求、测定法等内容参见《中国药典》四部通则0401“紫外-可见分光光度法
（二） 红外光谱法
1.红外分光光度法
红外分光光度法是在4000～400cm-1’波数范围内测定物质的吸收光谱，用于化合物的鉴别、检查或含量测定的方法。除部分光学异构体及长链烷烴同系物外，几乎没有两个化合物具有相同的红外光谱，据此可以对化合物进行定性和结构分析；化合物对红外辐射的吸收程度与其浓度的关系符合朗伯-比尔定律，是红外分光光度法定量分析的依据。
制备及测定供试品时，通常釆用压片法、糊法、膜法、溶液法和气体吸收法等进行测定。对于吸收特别强烈或不透明表面上的覆盖物等供试品，可采用如衰减全反射、漫反射和发射等红外光谱方法。对于极微量或需微区分析的供试品，可釆用显微红外光谱方法测定。除另有规定外，应按照国家药典委员会编订的《药品红外光谱集》各卷收载的各光谱图所规定的方法制备样品。具体操作技术参见《药品红外光谱集》的说明。仪器及其校正、供试品的制备及测定等内容参见《中国药典》四部通则0402“红外分光光度法”。
2.近红外分光光度法
近红外分光光度法是通过测定物质在近红外光谱区（波长范围在780～2500nm，按波数计为12800～4000cmT）的特征光谱并利用化学计量学方法提取相关信息，对物质进行定性、定量分析的一种光谱分析技术。近红外光谱主要由C—H、N—H、O—H和S-H等基团基频振动的倍频和合频组成，由于其吸收强度远低于物质中红外光谱（4000～400cm-1）的基频振动，而且吸收峰重叠严重，因此通常不能直接对其进行解析，而需要对测得的光谱数据进行数学处理后，才能进行定性、定量分析。
近红外分光光度法具有快速、准确、对样品无破坏的检测特性，不仅能进行“离线”分析，还能直接进行“在线”过程控制；不仅可以直接测定原料和制剂中的活性成分，还能对药品的某些理化性质如水分、脂肪类化合物的羟值、碘值和酸值等进行分析；并能对药物辅料、中间产物以及包装材料进行定性和分级。
近红外仪器装置、测量模式、影响因素、应用近红外分光光度法进行定性、定量分析的基本要求、模型验证、模型传递等内容参见《中国药典》四部指导原则9104“近红外分光光度法指导原则”。
（三）原子吸收分光光度法
原子吸收分光光度法的测量对象是呈原子状态的金属元素和部分非金属元素，是基于测量蒸气中原子对特征电磁辐射的吸收强度进行定量分析的一种仪器分析方法。原子吸收分光光度法遵循分光光度法的吸收定律，一般通过比较对照品溶液和供试品溶液的吸光度，计算供试品中待测元素的含量。原子吸收分光光度法是目前用于分析畲药中微量元素的重要方法之一。对仪器的一般要求、测定法等内容参见《中国药典》四部通则0406“原子吸收分光光度法”。
